液氮罐驗證

貯存液氮罐如何驗證

液氮罐(Liquid)不管在世界各國，都早已被運用在很多的醫藥學行業里，在醫療界關鍵運用于超低溫(Lowtemperature)儲存干細胞(cell)，血液樣版，冷藏(freezing)試管胚胎，及其人體冷凍(人體器官)等技術(technology)的實時控制都*它，那么貯存液氮罐又有什么特殊要求呢？

1：液氮罐主要用途是什么呢？

液氮罐主要是用來儲存液氮，用于后期的低溫實驗或儲存需要低溫保存的樣品如細胞、組織等（用于室內液氮的靜置貯存，不宜在工作狀態下作遠距離運輸使用）。

2：為什么液氮罐要做溫度分布驗證呢？

液氮罐主要是用來冷凍保存樣品，但是液氮的易揮發性、箱體的密封性等會對液氮罐的液氮量有較大的影響，我們都知道液氮的溫度是-196℃，但是在液氮罐中不止存在液氮，還存在液氣混合相，再往上還有氣相，這里面的溫差巨大，那么如何保證液氮在消耗的過程中依然可以保證足夠的低溫呢，這就需要用液氮罐驗證的數據來說話。 液氮驗證的數據來源于空載和滿載，在空載的狀態下，液氮的消耗量較低，所以一般數據有24h就可以，但是在滿載的狀態下，液氮的消耗量是大于空載的，所以我們一般建議滿載至少48h。

3：液氮罐溫度監控探頭和溫度分布探頭確認

對于氣相罐而言，液氮罐設備監控探頭至少應有一個位于裝載區域靠近罐體部位置，若有多個監控探頭的液氮罐，建議罐體部和底部至少放置一個探頭。在實驗中，溫度的探頭一般是分布在上下2層，那么，液氮隨著消耗越來越少，上層的探頭離液氮越遠，溫度也就越高，這就可能造成上層的溫度超標，所以試驗時間的長短對溫度影響很大，同時我們也知道，液氮罐里的液氮是可以添加的，所以我們在驗證過程中不添加液氮，48h的數據如果合格，那么在試驗樣品保存中只要及時添加液氮，就不會出現樣品保存溫度過高的情況，杜絕溫度過高的影響。

4：液氮罐的氣密性

影響液氮消耗的還有一個就是氣密性，如果液氮罐的氣密性比較好，能夠有效的減少液氮的揮發，而且保證液氮罐內氣相的穩定，不會出現溫度急劇上升的情況。而這個在使用中可以通過罐口的“水霧"的多少來判斷，罐口無“水霧"或者很少都能說明氣密性不錯。

最后一個我認為比較重要的是開蓋時間，在開蓋的狀態下，液氮會大量揮發，所以在開蓋取樣的過程中液氮的揮發造成的影響也需要考慮，取樣后的上層溫度在穩定后是否合格，防止由于人員開蓋操作時間過長導致的溫度超標風險。

5：液氮罐在使用時，要經常記錄液氮剩余量，也要及時補充液氮，那么什么時候補充液氮呢？如何測量液氮剩余量呢？

測量方法很簡單，使用探條測量液氮的深度就可以知道什么時候該充氮了，塑料桿作探條放入罐中一段時間，取出放在空氣中，探條上將出現一條箱線，這樣就可測得液氮的高度。如不及時充氮，液氮將耗盡。

另外一種方法是：先確定液氮罐的臨界重量(即該充氮時的重量)，然后每隔一段時間稱一次，當與臨界重量相同時，就該充氮了。

6：為了保證細胞儲存環境達標，應定期對液氮罐進行確認，部分常見的液氮罐確認項目如下：

6.1對于能夠自動充氮的液氮罐應定期檢查電磁閥連接以及運行情況。

6.2液氮補充罐壓力是否在接受范圍內。

6.3 低液位報警功能測試。

6.4.高溫報警功能確認，建議和低液位報警測試一起測試，可有效節約確認時間。

6.5 溫度監控探頭確認，對于氣相罐而言，液氮罐設備監控探頭至少應有一個位于裝載區域靠近罐體部位置，若有多個監控探頭的液氮罐，建議罐體部和底部至少放置一個探頭。

     6.6 溫度分布測試，使用校準過的溫度監控探頭在液氮罐內合理地均勻布置監測點，統計液氮罐實際儲存條件下的溫度是否在可接受范圍內。

     6.7 開蓋測試，模擬操作人員日常取細胞時對罐體的溫度影響，這項測試有助于規范液氮罐日常取樣操作流程，防止由于人員開蓋操作時間過長導致的溫度標風險。

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